Ultra Nuclease GMP-grade
Cat No: HC2016A
Ang UltraNuclease GMP-grade ay ipinahayag at pinadalisay sa Escherichia coli (E.coli) sa pamamagitan ng genetically engineered at inihanda sa ilalim ng mga GMP environment.Maaari nitong bawasan ang lagkit ng cell supernatant at cell lysate sa siyentipikong pananaliksik, pataasin ang kahusayan sa paglilinis ng protina at mapahusay ang pananaliksik sa functional na protina.Ang produkto ay maaari ring bawasan ang host nucleic acid residues sa pg-grade, pagpapabuti ng pagganap at kaligtasan ng mga biological na produkto ng mga application kabilang ang virus purification, vaccine manufacturing, at protina/polysaccharide pharmaceutical manufacturing.Bukod, ang produkto ay maaari ding ilapat upang maiwasan ang pagkumpol ng mga human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) sa cell therapy at pagpapaunlad ng bakuna.
Ang UltraNuclease ay ibinibigay sa anyo ng isang isterilisadong reagent, na pinahiran sa buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), na may hitsura ng walang kulay, transparent na likido.Ang produktong ito ay ginawa ng mga kinakailangan sa proseso ng GMP at ibinigay sa isang likidong anyo.
Mga bahagi
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Mga Kondisyon sa Imbakan
Ang produkto ay ipinadala na may tuyong yelo at maaaring itago sa -25℃~-15°C sa loob ng dalawang taon.
Kung ang produkto ay binuksan at naimbak sa 4 ℃ nang higit sa isang linggo, inirerekomenda namin ang pag-filterang produkto upang maiwasan ang kontaminasyon ng microbial.
Mga pagtutukoy
| Expression Host | Recombinant E. coli na may UltraNuclease gene |
| Molekular na Timbang | 26.5 kDa |
| soelectric point | 6.85 |
| Kadalisayan | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Kahulugan ng Yunit | Ang kahulugan ng isang Activity unit (U) ay ang dami ng enzyme na ginamitbaguhin ang halaga ng pagsipsip ng ΔA260 ng 1.0 sa loob ng 30 minuto sa isang 2. 625 mLsistema ng reaksyon sa 37 ℃ na may pH na 8.0 (katumbas ng kumpletong pagtunaw ng37 μg salmon sperm DNA sa oligonucleotides). |
Mga tagubilin
1. Sampol Koleksyon
Adherent cell: alisin ang medium, hugasan ang mga cell gamit ang PBS, at alisin ang supernatant.
Suspension cells: kolektahin ang mga cell sa pamamagitan ng centrifugation, hugasan ang mga cell gamit ang PBS, centrifuge sa 6,000rpm para sa 10 min, kolektahin ang pellet.
Escherichia coli: kolektahin ang bakterya sa pamamagitan ng centrifugation, hugasan ng isang beses gamit ang PBS, centrifuge sa 8,000rpm para sa 5 min, at kolektahin ang pellet.
2. Sample na Paggamot
Tratuhin ang mga nakolektang cell pellet na may lysis buffer sa ratio ng mass(g) sa volume(mL)1:(10-20), o sa pamamagitan ng mekanikal o kemikal na pamamaraan sa yelo o sa room temperature (1g ng cell pellet ay naglalaman ng humigit-kumulang
109 na mga cell).
3. Paggamot sa Enzyme
Magdagdag ng 1-5mM MgCl sa sistema ng reaksyon at ayusin ang pH sa 8-9.
Magdagdag ng UltraNuclease ayon sa ratio na 250 Units upang matunaw ang 1 g ng mga cell pellets, i-incubate sa 37 ℃ nang higit sa 30 minuto.Mangyaring sumangguni sa form na "Inirerekomendang Oras ng Reaksyon" upang piliin angtagal ng paggamot.
4. Supernatant Koleksyon
Centrifuge sa 12,000 rpm sa loob ng 30 minuto at kolektahin ang supernatant.
Tandaan: Kung acidic o alkaline ang solusyon, o naglalaman ng mataas na konsentrasyon ng asin, mga detergent, odenaturants, mangyaring taasan ang dosis ng enzyme o pahabain ang oras ng paggamot nang naaayon.
Inirerekomenda ang kondisyon ng reaksyonons
| Parameter | Pinakamainam na Kondisyon | Epektibong Kondisyon |
| Mg²+Konsentrasyon | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Konsentrasyon ng DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Konsentrasyon ng Mercaptoethanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent Cation Concentration | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Konsentrasyon ng Phosphate | 0-10 mM | 0-100 mM |
Inirerekomenda Reaksyon Oras (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Halaga ng UltraNuclease (Pangwakas na Konsentrasyon) | Oras ng Reaksyon |
| 0.25 U/mL | >10 h |
| 2.5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 minuto |
Mga Tala:
Mangyaring magsuot ng kinakailangang PPE, tulad ng lab coat at guwantes, upang matiyak ang iyong kalusugan at kaligtasan!
