Viral DNA/RNA Extraction Kit
Ang kit na ito ay angkop para sa mabilis na pagkuha ng high-purity viral DNA/RNA mula sa mga sample gaya ng nasopharyngeal swabs, environmental swab, cell culture supernatant, at tissue homogenate supernatant.Ang kit ay batay sa teknolohiya ng pagdalisay ng silica membrane na nag-aalis ng pangangailangan para sa paggamit ng phenol/chloroform na mga organikong solvent o pag-uulan ng oras na pag-ulan ng alkohol upang kunin ang viral DNA/RNA na may mataas na kalidad.Ang mga nucleic acid na nakuha ay walang mga impurities at handa nang gamitin sa downstream na mga eksperimento tulad ng reverse transcription, PCR, RT-PCR, real-time PCR, next-generation sequencing (NGS), at Northern blot.
Mga kondisyon ng imbakan
Mag-imbak sa 15 ~ 25 ℃, at dalhin sa temperatura ng silid
Mga bahagi
| Mga bahagi | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| RNase-free ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNA Column | 100 |
| Mga Tubong Koleksyon (2ml) | 100 |
| RNase-free Collection Tube(1 .5ml) | 100 |
Buffer VL:Magbigay ng kapaligiran para sa lysis at pagbubuklod.
Buffer RW:Alisin ang mga natitirang protina at iba pang mga dumi.
RNase-free ddH2O:I-elute ang DNA/RNA mula sa lamad sa spin column.
FastPure RNA Column:Partikular na i-adsorb ang DNA/RNA.
Mga Tubong Koleksyon 2 ml:Kolektahin ang filtrate.
RNase-free Collection Tubes 1.5 ml:Kolektahin ang DNA/RNA.
Mga aplikasyon
Nasopharyngeal swab, environmental swab, cell culture supernatant, at tissue homogenate supernatant.
Inihanda sa sarili si Materials
RNase-free pipette tip, 1.5 ml RNase-free centrifuge tubes, centrifuge, vortex mixer, at pipette.
Proseso ng Eksperimento
Gawin ang lahat ng sumusunod na hakbang sa isang biosafety cabinet.
1. Magdagdag ng 200 μl ng sample sa isang RNase-free centrifuge tube (bumubuo ng PBS o 0.9% NaCl kung sakaling hindi sapat ang sample), magdagdag ng 500 μl ng Buffer VL, ihalo nang mabuti sa pamamagitan ng vortexing para sa 15 - 30 sec, at centrifuge sandali upang kolektahin ang timpla sa ilalim ng tubo.
2. Ilagay ang FastPure RNA Column sa isang Collection Tubes 2 ml.Ilipat ang timpla mula sa Hakbang 1 sa FastPure RNA Columns, centrifuge sa 12,000 rpm (13,400 × g) sa loob ng 1 min, at itapon ang filtrate.
3. Magdagdag ng 600 μl ng Buffer RW sa FastPure RNA Columns, centrifuge sa 12,000 rpm (13,400 × g) sa loob ng 30 segundo, at itapon ang filtrate.
4. Ulitin ang Hakbang 3.
5. I-centrifuge ang walang laman na column sa 12,000 rpm (13,400 × g) sa loob ng 2 min.
6. Maingat na ilipat ang FastPure RNA Columns sa isang bagong RNase-free Collection Tubes 1.5 ml (ibinigay sa kit), at magdagdag ng 30 – 50 μl ng RNase-free ddH2O sa gitna ng membrane nang hindi hinahawakan ang column.Hayaang tumayo sa temperatura ng kuwarto ng 1 min at centrifuge sa 12,000 rpm (13,400 × g) sa loob ng 1 min.
7. Itapon ang FastPure RNA Column.Ang DNA/RNA ay maaaring gamitin nang direkta para sa mga kasunod na pagsusuri, o nakaimbak sa -30~ -15°C para sa isang maikling panahon o -85 ~-65°C para sa mas mahabang panahon.
Mga Tala
Para sa paggamit ng pananaliksik lamang.Hindi para gamitin sa mga diagnostic procedure.
1. I-equilibrate ang mga sample sa temperatura ng silid nang maaga.
2. Ang mga virus ay lubhang nakakahawa.Pakitiyak na ang lahat ng kinakailangang pag-iingat sa kaligtasan ay ginawa bago ang eksperimento.
3. Iwasan ang paulit-ulit na pagyeyelo at pagtunaw ng sample, dahil ito ay maaaring humantong sa pagkasira o pagbawas ng ani ng nakuhang viral DNA/RNA.
4. Kasama sa self-prepared equipment ang RNase-free pipette tip, 1.5 ml RNase-free centrifuge tubes, centrifuge, vortex mixer, at pipette.
5. Kapag ginagamit ang kit, magsuot ng lab coat, disposable latex gloves, at disposable mask at gumamit ng RNase-free consumables upang mabawasan ang panganib ng kontaminasyon ng RNase.
6. Gawin ang lahat ng mga hakbang sa temperatura ng silid maliban kung tinukoy.
Mekanismo at Daloy ng Trabaho
