M-MLV Neoscript Reverse Transcriptase

Ang Neoscript Reverse Transcriptase ay isang reverse transcriptase na nakuha sa pamamagitan ng mutation screening ng M-MLV gene ng Moloney murine leukemia virus na pinagmulan at pagpapahayag sa E.coli.Inaalis ng enzyme ang aktibidad ng RNase H, may mas mataas na pagpapaubaya sa temperatura, at angkop para sa reverse transcription na may mataas na temperatura.Samakatuwid, ito ay kapaki-pakinabang para sa pag-aalis ng hindi kanais-nais na mga epekto ng mataas na antas ng istraktura ng RNA at hindi tiyak na mga kadahilanan sa cDNA synthesis, at may mas mataas na katatagan at reverse transcription synthesis na kakayahan.Ang enzyme ay may mas mataas na katatagan at reverse transcription synthesis na kakayahan.

Mga bahagi

1.200 U/μL Neoscript Reverse Transcriptase

2.5 × First-Strand Buffer (opsyonal)

* 5 × Ang First-Strand Buffer ay hindi naglalaman ng dNTP, mangyaring magdagdag ng mga dNTP kapag inihahanda ang sistema ng reaksyon

Inirerekomendang Aplikasyon

1.Isang hakbang na qRT-PCR.

2.Pagtuklas ng RNA virus.

Kondisyon ng Imbakan

-20°C para sa pangmatagalang imbakan, dapat ihalo nang mabuti bago gamitin, iwasan ang madalas na freeze-thaw.

Kahulugan ng Yunit

Ang isang unit ay may kasamang 1 nmol ng dTTP sa loob ng 10 minuto sa 37°C gamit ang poly(A)•oligo(dT)₂₅bilang template/primer.

Kontrol sa Kalidad

1.SDS-PAGE electrophoretic purity na higit sa 98%.

2.Pagkasensitibo ng amplification, kontrol ng batch-to-batch, katatagan.

3.Walang exogenous nuclease activity, walang exogenous endonuclease o exonuclease contamination

Setup ng Reaksyon para sa First Chain Reaction Solution

1.Paghahanda ng pinaghalong reaksyon

Mga Tala:a/b: Mangyaring pumili ng iba't ibang uri ng panimulang aklat ayon sa iyong mga pang-eksperimentong pangangailangan.

2.Painitin sa 65°C sa loob ng 5mins at mabilis na palamig sa yelo sa loob ng 2min.

3.Idagdag ang mga sumusunod na bahagi sa system sa itaas sa kabuuang dami na 20µL at ihalo nang malumanay:

4. Mangyaring gawin ang reaksyon ayon sa mga sumusunod na kondisyon:

(1) Kung Random Primer ang ginamit, ang reaksyon ay dapat isagawa sa 25 ℃ sa loob ng 10mins, at pagkatapos ay sa 50 ℃ para sa 30~60mins;

(2) Kung Oligo dT o mga partikular na panimulang aklat ang ginamit, ang reaksyon ay dapat isagawa sa 50 ℃ sa loob ng 30~60mins.

5.Painitin sa 95 ℃ sa loob ng 5mins upang hindi aktibo ang Neoscript Reverse Transcriptase at wakasan ang reaksyon.

6.Ang mga produkto ng reverse transcription ay maaaring gamitin nang direkta sa PCR reaction at fluorescence quantitative PCR reaction, o nakaimbak sa -20 ℃ sa mahabang panahon.

PCR Raksyon：

1.Paghahanda ng pinaghalong reaksyon

Mga Tala:a: Kung masyadong maraming unang chain reaction solution ang idinagdag, ang PCR reaction ay maaaring ma-inhibit.

2.Pamamaraan ng Reaksyon ng PCR

Mga Tala

1.Angkop para sa reverse transcription temperature optimization sa hanay na 42 ℃~55 ℃.

2.Ito ay may mas mahusay na katatagan, ay angkop para sa mataas na temperatura reverse transcription amplification.Bilang karagdagan, ito ay kanais-nais para sa mahusay na pagpasa sa mga kumplikadong istrukturang rehiyon ng RNA.Gayundin, itoay angkop para sa one-step multiplex fluorescence quantitative RT-PCR detection.

3.Mahusay na pagkakatugma sa iba't ibang mga PCR amplification enzyme at angkop para sa mataas na sensitivity na mga reaksyon ng RT-PCR.

4.Angkop para sa mataas na sensitivity one-step fluorescence quantitative RT-PCR reaction, epektibong mapabuti ang detection rate ng mababang konsentrasyon ng mga template.

5.Angkop para sa pagtatayo ng library ng cDNA.