Sample Release Reagent
Ang Sample Release Reagent ay para sa molecular POCT diagnostic scenario.Para sa dalawang sistema ng direct amplification LAMP at direct amplification PCR, hindi na kailangan ang nucleic acid extraction.Ang krudo lysate ng sample ay maaaring direktang palakihin, ang target na gene ay maaaring tumpak na matukoy, ang oras ng pagtuklas ng sample ay maaaring mas paikliin, na perpektong tumutugma sa mga kinakailangan sa aplikasyon ng molekular na POCT.Ito ay angkop para sa mga pamunas ng ilong, pamunas sa lalamunan at iba pang mga uri ng sample.Ang mga naprosesong sample ay maaaring direktang gamitin para sa real-time na fluorescence quantitative PCR o LAMP detection, at ang parehong mga resulta tulad ng mga conventional extraction na pamamaraan ay maaaring makamit nang walang kumplikadong mga operasyon sa pagkuha ng nucleic acid.
Mga Kondisyon sa Imbakan
Transport at mag-imbak sa temperatura ng kuwarto.
Kontrol sa kalidad
Functional detection – quantitative qPCR: Ang 800μl Sample Release Reagent system ay pinalaki
na may 1000 kopya ng Novel Pseudovirus, isang sample ng pamunas ng ilong, na nagreresulta ng katulad na mga kurba ng amplification atMga halaga ng ΔCt sa loob ng ± 0.5 Ct.
Eksperimental na Pamamaraanres
1. Kumuha ng 800 μl Sample Release Reagent at ikalat ang lysis solution sa 1.5 mL sampling tube
2. Kunin ang nasal swab o throat swab gamit ang pamunas;Nasal swab sampling procedure: kunin ang sterile swab at ilagay ito sa mga butas ng ilong, dahan-dahang umabante sa mga 1.5 cm ang lalim, malumanay na paikutin ng 4 na beses laban sa nasal mucosa nang higit sa 15 segundo , pagkatapos ay ulitin ang parehong operasyon sa kabilang lukab ng ilong na may parehong pamunas. Pamamaraan ng sampling ng throat swab: kunin ang sterile swab at malumanay, mabilis na punasan ang pharyngeal tonsils at rear pharyngeal wall ng 3 beses.
3.Ilagay kaagad ang pamunas sa sampling tube.Ang ulo ng pamunas ay dapat na paikutin at ihalo sa solusyon sa imbakan nang hindi bababa sa 30 segundo upang matiyak na ang sample ay ganap na na-eluted sa sampling tube.
4. Incubation sa room temperature (20~ 25℃) sa loob ng 1min, ang paghahanda ng lysis buffer ay nakumpleto.
5. Parehong tugma ang 25μl system RT-PCR at RT-LAMP sa 10μl na dami ng template na karagdagan para sa mga eksperimento sa pag-detect.
Mga Tala
1. Ang pinakamababang halaga ng sample na direktang lysate na naaayon sa isang solong pamunas ay maaaring iakma sa 400μl, na maaaring iakma ayon sa mga pangangailangan sa pagsubok.
2. Kapag ang sample ay naproseso ng sample release reagent, inirerekomenda na magsagawa ng susunod na yugto ng pagsubok sa lalong madaling panahon, ang pagitan ng oras ng paghihintay ay mas mainam na wala pang 1 oras.
3. Ang pH ng sample lysate ay acidic, at ang detection system ay kailangang magkaroon ng isang tiyak na buffer.Ito ay angkop para sa karamihan ng PCR, RT-PCR, at LAMP fluorescence detection na may pH buffer, ngunit hindi angkop para sa LAMP colorimetric detection nang walang buffer.
