Phosphatase Alkaline (ALP)
Paglalarawan
Ang Alkaline Phosphatase ay nagmula sa isang recombinant na E. coli strain na nagdadala ng TAB5 gene.Ang enzyme ay nag-catalyze sa dephosphorylation ng 5' at 3' na dulo ng DNA at RNA phosphomonoesters.Gayundin, hydrolyses nito ang ribose, pati na rin ang mga deoxyribonucleoside triphosphate (NTP at dNTP).Ang TAB5 Alkaline Phosphatase ay kumikilos sa 5' nakausli, 5' recessed at blunt na dulo.Maaaring gamitin ang Phosphatase sa maraming application ng molecular biology, tulad ng cloning o probe end labeling upang alisin ang mga phosphorylated na dulo ng DNA o RNA.Sa mga eksperimento sa pag-clone, pinipigilan ng dephosphorylation ang linearized plasmid DNA mula sa self-ligation.Maaari din nitong i-degrade ang mga unincorporated na dNTP sa mga reaksyon ng PCR upang maghanda ng template para sa DNA sequencing.Ang enzyme ay ganap at irreversibly inactivated sa pamamagitan ng pag-init sa 70°C sa loob ng 5 minuto, kaya hindi na kailangan ang pag-alis ng phosphatase bago ang ligation o end labeling.
Paggamit
1. Ang alkaline phosphatase na isinama sa mga protina (antibodies, streptavidin atbp,) ay maaaring partikular na matukoy ang mga target na molekula, at maaaring magamit sa ELISA, WB at histochemical detection;
2. Ang alkaline phosphatase ay maaaring gamitin upang i-dephosphorize ang 5'-terminal ng DNA o RNA upang maiwasan ang self-linking;
3. Ang nasa itaas na dephosphorylated DNA o RNA ay maaaring lagyan ng label ng radio-labeled phosphates (sa pamamagitan ng T4 poly-nucleotide kinase)
Istruktura ng Kemikal
Pagtutukoy
| Mga Item sa Pagsubok | Mga pagtutukoy |
| Aktibidad ng Enzyme | 5U/μL |
| Aktibidad ng Endonuclease | Hindi natukoy |
| Aktibidad ng Exonuuclease | Hindi natukoy |
| Aktibidad sa Nicking | Hindi natukoy |
| Aktibidad ng RNase | Hindi natukoy |
| E.coli DNA | ≤1kopya/5U |
| Endotoxin | LAL-Test, ≤10EU/mg |
| Kadalisayan | ≥95% |
Transportasyon at imbakan
Transportasyon:Ambient
Imbakan :Mag-imbak sa 2-8°C
Inirerekomendang muling pagsubokBuhay:2 taon
