Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Paglalarawan
Cat No: HCR5141A
Ang Multiplex One Step RT-qPCR Premix ay isang multiplex quantitative PCR Kit batay sa RNA bilang template.Sa eksperimento, ang reverse transcription at quantitative PCR ay ginagawa sa parehong reaction tube, na pinapasimple ang eksperimentong operasyon at binabawasan ang panganib ng kontaminasyon.Ang natatanging disenyo ng buffer at enzyme mix ay maaaring gamitin sa one-step lyophilized system.Ang kit ay gumagamit ng heat-resistant Reverse Transcriptase para sa mahusay na synthesis ng unang strand cDNA gamit ang hotstart Taq DNA Polymerase para sa quantitative amplification.Naglalaman ito ng na-optimize na buffer ng reaksyon, paghahalo ng mga enzyme atbp., at mga salik na epektibong pumipigil sa non-specific na PCR amplification at nagpapahusay sa kahusayan ng amplification ng maraming reaksyon ng qPCR ay idinagdag, na nagpapagana ng maramihang fluorescence quantitative amplification habang tinitiyak ang kahusayan ng amplification ng mga primer.
Mga bahagi
| Pangalan |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Tagapagtanggol ng Lyo |
Kondisyon ng transportasyonion
A: Lyo-buffer at protectant: -25~-15℃, ang shelf life ay 1 taon.
B: Lyo-enzyme mix, 2-8 ℃, shelf life ay 6 na buwan.
Mga tagubilin para sa operasyon
1. Reaction System (Kunin ang 25μL bilang halimbawa)
| Mga bahagi | Dami (μL) | Pangwakas na Konsentrasyon |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Halo ng Lyo-Enzyme | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Probe Mix (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| Template ng RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Hanggang 25 | - |
2. Optimized Cycling Protocol
1) Standard Cycling Protocol
| Yugto ng reaksyon | Temperatura | Oras | Ikot | |
| 1 | Baliktad na transkripsyon | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Paunang denaturation | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | Reaksyon ng amplification | 95°C | 15seg | 45 cycle |
| 60°Cb | 30segc |
2) Mabilis na Protocol sa Pagbibisikleta
|
| Yugto ng reaksyon | Temperatura | Oras | Ikot |
| 1 | Baliktad na transkripsyon | 50°Ca | 2min | 1 |
| 2 | Paunang denaturation | 95°C | 2seg | 1 |
| 3 | Reaksyon ng amplification | 95°C | 1seg |
45 cycle |
| 60°Cb | 13segc |
Tandaan:
a) Reverse transkripsyon: Ang temperatura ay maaaring pumili ng 42°C o 50°C sa loob ng 10-15 minuto.
b) Reaksyon ng amplification: Ang temperatura ay inaayos ayon sa halaga ng Tm ng mga dinisenyong primer.
c)Fluorescence hudyat pagkuha: Mangyaring itakda ang pang-eksperimentong pamamaraan ayon sa mga kinakailangan ngmanwal ng instrumento.
Teknikal na Impormasyon/Mga Detalye
| Mainit na Simula | Built-in na mainit na simula |
| Paraan ng pagtuklas | Pagtuklas ng primer-probe |
| Paraan ng PCR | Isang hakbang RT-qPCR |
| Uri ng sample | RNA |
Mga Tala
1. Ang produktong ito ay para lamang sa paggamit ng pananaliksik.
2. Mangyaring magsuot ng kinakailangang PPE, tulad ng lab coat at guwantes, upang matiyak ang iyong kalusugan at kaligtasan!
