BspQI
Ang BspQI ay maaaring recombinantly na ipinahayag sa E. coli na maaaring makilala ang mga partikular na site at ginawa sa ilalim
Ang BspQI, isang IIs restriction endonuclease restriction endonuclease, ay nagmula sa isang recombinant na E. coli strain na nagdadala ng na-clone at binagong BspQI gen mula sa Bacillus sphaericus.Maaari nitong makilala ang mga partikular na site, at ang pagkakasunud-sunod ng pagkilala at mga cleavage site ay ang mga sumusunod:
5' · · · ·GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
Mga Tampok ng Produkto
1. Mataas na aktibidad, Mabilis na panunaw;
2. Low star activity, tinitiyak ang tumpak na pagputol tulad ng "scalpel";
3. Walang BSA at walang pinagmulan ng hayop;
Sensitivity ng Methylation
Dam methylation:Hindi Sensitibo;
Dcm methylation:Hindi Sensitibo;
CpG Methylation:Hindi Sensitibo;
Mga kondisyon ng imbakan
Ang produkto ay dapat ipadala ≤ 0 ℃;Mag-imbak sa -25~- 15℃ na kondisyon.
Buffer ng imbakan
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg/ml Recombinant Albumin, 0. 1% Trition X- 100 at 50% glycerol (pH 7.0 @ 25°C).
Kahulugan ng Yunit
Ang isang yunit ay tinukoy bilang ang dami ng enzyme na kinakailangan upang matunaw ang 1µg ng Internal control DNA sa 1 oras sa 50°C sa kabuuang dami ng reaksyon na 50 µL.
Kontrol sa Kalidad
Protein Purity Assay (SDS-PAGE):Ang kadalisayan ng BspQI ay ≥95% na tinutukoy ng pagsusuri ng SDS-PAGE.
RNase:Ang 10U ng BspQI na may 1.6μg MS2 RNA sa loob ng 4 na oras sa 50 ℃ ay hindi nagbubunga ng pagkasira tulad ng tinutukoy ng agarose gel electrophoresis.
Non-Specific na DNase na Aktibidad:Ang 10U ng BspQI na may 1μg λ DNA sa 50 ℃ sa loob ng 16 na oras, kumpara sa 50 ℃ para sa 1 oras, ay hindi nagbubunga ng labis na DNA gaya ng tinutukoy ng agarose gel electrophoresis.
Ligation at Recutting:Pagkatapos ng pagtunaw ng 1 μg λDNA na may 10U BspQI, ang mga fragment ng DNA ay maaaring i-ligate ng T4 DNA ligase sa 16ºC.At ang mga ligated na fragment na ito ay maaaring i-recut gamit ang BspQI.
E. coli DNA: E. coli 16s rDNA-specific TaqMan qPCR detection ay nagpakita na ang E.coli genome residue ≤ 0.1pg/ul.
Nalalabi sa protina ng host:≤ 50 ppm
Bakterya Endotoxin: LAL-test, ayon sa Chinese Pharmacopoeia IV 2020 edition, gel limit test method, pangkalahatang tuntunin (1143).Ang nilalaman ng bacterial endotoxin ay dapat na ≤10 EU/mg.
Sistema ng reaksyon at kundisyon
| Component | Dami |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| DNA | 1 μg |
| 10 x BspQ I Buffer | 5 μL |
| dd H2O | Hanggang sa 50 μL |
Mga kondisyon ng reaksyon: 50 ℃, 1~ 16 h.
Hindi aktibo ang init:80°C sa loob ng 20 min.
Ang inirerekomendang sistema ng reaksyon at mga kondisyon ay maaaring magbigay ng medyo magandang epekto ng pantunaw ng enzyme, na para sa sanggunian lamang, mangyaring sumangguni sa mga eksperimentong resulta para sa mga detalye.
Application ng produkto
Restriction endonuclease digestion, Mabilis na pag-clone.
Mga Tala
1. Ang dami ng enzyme ≤ 1/10 ng dami ng reaksyon.
2. Maaaring mangyari ang aktibidad ng bituin kapag ang konsentrasyon ng gliserol ay higit sa 5%.
3. Maaaring mangyari ang aktibidad ng cleavage kapag ang substrate ay mas mababa sa inirerekomendang ratio.
