Ultra Nuclease
Ang UltraNuclease ay isang genetically engineeredendonuclaese na nagmula sa Serratia marcescens, na may kakayahang pababain ang DNA o RNA, doble o solong stranded, linear o pabilog sa ilalim ng isang malawak na hanay ng kondisyon, ganap na ibababa ang mga nucleic acid sa 5'-monophosphate oligonucleotides na may 3-5base na haba .Pagkatapos ng genetic engineering modification, ang produkto ay fermented, ipinahayag, at purified sa Escherichia coli (E. coli), na binabawasan ang viscosity ng cell supernatant at cell lysate inscientific research, ngunit din mapabuti ang purification efficiency at functional research ng protina.Maaari rin itong gamitin sa gene therapy, virus purification, vaccine production, proteinat polysaccharide pharmaceutical industry bilang host residue nucleic acid reagent reagent.
Mga Tampok ng Produkto
| Cas No. | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| Molekular na Timbang | 30kDa |
| Isoelektrikong Punto | 6.85 |
| Kadalisayan ng Protina | ≥99%（ SDS-PAGE at SEC-HPLC） |
| Tiyak na Gawain | ≥1.1×106U/mg |
| Pinakamainam na Temperatura | 37°C |
| Pinakamainam na pH | 8.0 |
| ProteaseActivity | negatibo |
| Bioburden | ＜10CFU/100,000U |
| Natirang Host-cell Protein | ≤10ppm |
| Mabigat na metal | ≤10ppm |
| Bakterya na Endotoxin | ＜0.25EU/1000U |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 ， 20mM NaCl, 50% Glycerol |
Mga kondisyon ng imbakan
≤0°C transportasyon；-25~-15°C Storage，2 taong validity (iwasan ang pagyeyelo-pagtunaw).
Kahulugan ng Yunit
Ang dami ng enzyme na ginamit para baguhin ang absorption value ng △A260 ng 1.0 sa loob ng 30min sa 37 °C, pH 8.0, katumbas ng digested 37μg salmon sperm DNA sa pamamagitan ng pagputol sa oligonucleotides, ay tinukoy bilang isang aktibong unit(U).
Kontrol sa kalidad
Natirang Host-cell Protein: ELISA kit
•Protease Mga nalalabi: 250KU/mL UltraNuclease reacted na may substrate para sa 60min, walang aktibidad na nakita.
•Bakterya na Endotoxin: LAL-Test, Pharmacopoeia ng People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) na paraan ng pagsubok sa limitasyon ng gel.Mga Pangkalahatang Panuntunan (1143).
•Bioburden: Pharmacopoeia ng People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition)— Pangkalahatan
Mga Panuntunan para sa Sterility Test (1101), PRC National Standard, GB 4789.2-2016.
•Mabigat na metal:ICP-AES, HJ776-2015.
Operasyon
Ang aktibidad ng UltraNuclease ay makabuluhang napigilan kapag ang konsentrasyon ng SDS ay higit sa 0.1% o EDTA
ang konsentrasyon ay higit sa 1mM. Ang Surfactant Triton X- 100, Tween 20 at Tween 80 ay walang epekto sa nuclease
mga katangian kapag ang konsentrasyon ay nasa ilalim ng 1.5%.
| Operasyon | Pinakamainam na Operasyon | Wastong Operasyon |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2mM | 1- 15mM |
| DTT | 0- 100mM | >100mM |
| 2-Mercaptoethanol | 0- 100mM | >100mM |
| Monovalent metal ion （Na+, K+ atbp.) | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Paggamit at Dosis
• Alisin ang exogenous nucleic acid mula sa mga produkto ng bakuna, bawasan ang panganib ng natitirang nucleic acid toxicity at pagbutihin ang kaligtasan ng produkto.
• Bawasan ang lagkit ng feed liquid na dulot ng nucleic acid, paikliin ang oras ng pagproseso at pataasin ang ani ng protina.
• Alisin ang nucleic acid na bumabalot ng particle (virus, inclusion body, atbp.), na nakakatulong
sa paglabas at paglilinis ng butil.
| Uri ng Eksperimental | Produksyon ng protina | Virus, Bakuna | Mga Gamot sa Cell |
| Numero ng mga Cell | 1g cell wet weight (muling sinuspinde gamit ang 10ml buffer) | 1L fermentation likidong supernatant | 1L kultura |
| Pinakamababang Dosis | 250U | 100U | 100U |
| Inirerekomendang Dosis | 2500U | 25000U | 5000U |
• Maaaring mapabuti ng paggamot sa nuclease ang paglutas at pagbawi ng sample para sa column chromatography, electrophoresis at blotting analysis.
• Sa gene therapy, ang nucleic acid ay inalis upang makakuha ng purified adeno-associated virus.
