2×PCR Super Mix (may Dye)
Ang 2× PCR Master Mix ay naglalaman ng Taq DNA Polymerase, mga dNTP, at iba pang sangkap na kinakailangan ng PCR.Ang Master Mix ay stable sa loob ng 3 buwan sa 4 ℃ sa aming mga customized na stabilizer.Ang pre-mix solution ay na-optimize para sa conventional PCR at handa nang gamitin sa pamamagitan ng pagdaragdag ng DNA template at mga primer.Ang mga produkto ng PCR ay maaaring direktang i-load para sa electrophoresis na may pre-loaded na bromophenol blue dye.Ang mga amplified na produkto ay naglalaman ng 3'-dA protrusion at madaling ma-clone sa T vector.Pinapasimple ng 2×PCR Master Mix ang pamamaraan ng PCR at binabawasan ang kontaminasyon.
Mga Kondisyon sa Imbakan
Ang mga produkto ay dapat na naka-imbak sa -25℃~-15℃ sa loob ng 2 taon.
Mga pagtutukoy
| Fidelity(vs.Taq) | 1× |
| Mainit na Simula | No |
| Overhang | 3 '-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Format ng Reaksyon | SuperMix o Master Mix |
| Bilis ng Reaksyon | Pamantayan |
| Uri ng Produkto | PCR Master Mix (2x) |
Mga tagubilin
1.Sistema ng Reaksyon
| Mga bahagi | Dami(μL) |
| Template ng DNA | Angkop |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | hanggang 50 |
2.Protokol ng Amplification
| Mga hakbang sa pag-ikot | Temperatura (°C) | Oras | Mga cycle |
| Paunang denaturation | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 | 30 seg | 35 |
| Pagsusupil | 50-60 | 30 seg | |
| Extension | 72 | 30-60 seg/kb | |
| Panghuling extension | 72 | 10 min | 1 |
Tandaan:
1) Paggamit ng template: 50-200ng genomic DNA;0.1-10ng plasmid DNA.
2) Mg2+konsentrasyon: Ang produktong ito ay naglalaman ng 3mM ng MgCl2, na angkop para sa karamihan ng mga reaksyon ng PCR.
3) Temperatura ng pagsusubo: Mangyaring sumangguni sa teoretikal na halaga ng Tm ng mga panimulang aklat.Ang temperatura ng pagsusubo ay maaaring itakda sa 2-5 ℃ na mas mababa kaysa sa teoretikal na halaga ng panimulang aklat.
4) Extention time: Para sa molecular identification, 30 sec/kb ay inirerekomenda.Para sa pag-clone ng gene, inirerekomenda ang 60 sec/kb.
Mga Tala
1.Ang mga produktong PCR na may 2× PCR Master Mix ay hindi angkop para sa polyacrylamide gel electrophoresis.
2.Para sa iyong kaligtasan at kalusugan, mangyaring magsuot ng mga lab coat at disposable gloves para sa operasyon.
3.Ito ay ginagamit para sa paggamit ng pananaliksik LAMANG!
